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技術文章 / article
胎牛血清出現黑點原因分析及如何預防
2017-10-10 瀏覽次數:1530
胎牛血清細胞培養中出現黑點是污染嗎?又該如何處理?
一旦您在胎牛血清細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
1、細血清質量不好,反復凍融的結果;
2、配制培養基的水質、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
3、配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
4、胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
5、培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
胎牛血清細胞培養中如何防止黑點生成?
1、培養基保持*PH值7.0-7.2。
2、培養基無需37℃水浴。
3、盡可能地減少血清凍融次數。
4、嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
5、掌握細胞傳代的*時機,細胞切勿生長過老。
一旦您在胎牛血清細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
1、細血清質量不好,反復凍融的結果;
2、配制培養基的水質、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
3、配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
4、胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
5、培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
胎牛血清細胞培養中如何防止黑點生成?
1、培養基保持*PH值7.0-7.2。
2、培養基無需37℃水浴。
3、盡可能地減少血清凍融次數。
4、嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
5、掌握細胞傳代的*時機,細胞切勿生長過老。