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       技術文章 / article
        
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      使用血清的小技巧
      
          
      2022-01-14     瀏覽次數：1269
      
        
      
        
      
      
      1.血清必須貯存于?20～ -70℃，若存放于4℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10%， 必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。

      2.一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發現血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養基內一起過濾，勿直接過濾血清。!`%V5
      3.瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或?70℃至4℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發生。勿直接由20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沈淀。
      4.熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍之血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement)去活化。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為會造成沈淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。補體受到破壞。
      5.勿將血清置于37℃太久，若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。
      6.血清之沈淀物
      6.1.凝絮物：發生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin)造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心3000rpm,5min去除，或離心后上清液可以加入培養基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。生物
      6.2.顯微鏡下觀察之?小黑點：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是小黑點，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在37℃中欲培養此微生物，但在37℃環境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養細菌之培養基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。


      
        
      
        
      
      
    
      



  
      
              
      
	
	


 










      
	
      
		
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